eRapport

Cøliaki -- T-celler til besvær

Prosjekt
Prosjektnummer
2008036
Ansvarlig person
Ludvig M. Sollid
Institusjon
Oslo universitetssykehus HF
Prosjektkategori
Doktorgradsstipend
Helsekategori
Inflammatory and Immune System
Forskningsaktivitet
1. Underpinning
Rapporter
2012 - sluttrapport
Prosjektet har fullført sitt hovedmål, nemlig å studere gluten-reaktive T-celler med tanke på å utvikle av alternativ behandling ved sykdommen. Det er gjort studier av cøliakipasienter som ikke har de HLA molekylene som er typiske for cøliaki, nemlig HLA-DQ2.5 og HLA-DQ8. Det er laget gluten-reaktive T-celle kloner fra slike pasienter og det er identifisert nye gluten T-celle epitoper. Resultatene er publisert i to artikler. Det er undersøkt om gluten-reaktive T-celler i tarmen er såkalte Th17-effektorceller. Konklusjonen er at det er de ikke. T-cellene produserer derimot cytokinene interferon-gamma og interleukin-21. Studien er publisert i en artikkel. Implikasjonen fra studien er at behandling rettet mot Th17 celler ikke er relevant ved cøliaki. Det er gjort studier av gluten-spesifikke T-cellene som dukker opp i blodet etter gluten-provokasjon ved HLA-tetramer teknologi. Resultatene bearbeides og vil bli publisert. Etter avtale med Helse-Sør Øst har Melinda Raki vært lønnet som postdok i projektet. Stipendiat Michael Bodd har også vært lønnet en kort periode (4 mnd) fra prosjektet. Det er gjort studier som er relevante for utvikling av ny diagnostikk og behandling av sykdommen cøliaki.
2011
I dette prosjektet karakteriserer vi i detalj gluten-spesifikke T-celler. Vår gruppe har utviklet en metode hvor vi kan farge antigen-spesifikke T-celler med HLA tetramerteknologi. Vi bruker denne metoden til å isolere gluten-spesifikke T-celler slik at vi kan undersøke dem videre med tanke på differensiering og T-cellereseptorbruk.T-cellene karakteriseres hovedsakelig med flow cytometri, med henblikk på cytokinproduksjon og uttrykk av spesifikke T-celle reseptorer. Sammen med 1. amanuensis Shuo-Wang Qiao har vi undersøkt T-celle-reseptorbruk i gluten-spesifikke celler sammenlignet med andre CD4+ T-celler i pasientene. En artikkel som omtaler disse funnene er publisert. Vi har gjort studier med følsom RT PCR for å kartlegge hvilke transkripsjonsfaktorer som er uttrykt i gluten-spesifikke T-celler isolert med HLA tetramer. Resulatene så langt passer godt med tidligere undersøkelser av cytokin profilen til gluten spesifikke T-celler. Stipendat Michael Bodd vil studere celler fra ytterligere noen cøliakipasienter. Planen er å skrive sammen resultatene til en artikkel i løpet av primo 2012. Stipendiat Michael Bodd har studert T-celle reponsen mot gluten hos cøliakipasienter som er DQ2.2 og som ikke bærer andre HLA-DQ molekyler som er assosisert med sykdommen. Han har funnet at disse cøliakipasientene har gluten-reaktive T-celler, og at mange av T-cellene gjenkjenner en epitope fra glutenin som ikke gjenkjennes ofte av T-eller fra pasienter som er DQ2.5. De gluten-reaktive T-cellene fra DQ2.2 pasientene gjenkjenner derimot ikke epitoper som T-celler fra DQ2.5 pasienter gjenkjenner. Funnene kan forklare hvorfor risikoen for cøliaki er vidt forskjellig mellom DQ2.5 (høy) og DQ2.2 (lav). Funnene vil bli publisert i en artikkel i Gastroenterology. I samarbeid med en nederlandsk gruppe ledet av Janneke Samsom har vi undersøkt markører som kan identifisere celler i blod som var imprintet i tarmslimhinne. En artikkel om disse funnene er publisert. Sammen med stipendiat Margit Brottveit og overlege Knut Lundin har vi undersøkt om farging av gluten spesifikke T-celler med tetramerteknikk kan brukes som diagnostisk hjelpemiddel. Resulatene, som er lovende, er skrevet sammen og publisert.
2010
Dette prosjektet fokuserer hovedsakelig på karakterisering av gluten-spesifikke T-celler som dukker opp i blodet etter glutenprovokasjon. Vår gruppe har utviklet en fargemetode, hvor gluten-spesifikke T-celler detekteres direkte i perifert blod med tetramerteknologi. Blant annet bruker vi dette til å sortere cellene og undersøke dem videre, mtp differensiering og T-celle-reseptorbruk.T-cellene karakteriseres hovedsakelig med flow cytometri, med henblikk på cytokinproduksjon og uttrykk av T-cellereseptorvarianter. Andre markører, herunder CD154, ble også undersøkt med tanke på å erstatte tetramerer ved detektering av sirkulerende gluten-spesifikke T-celler. Det blir også brukt PCR for å undersøke hvilke transkripsjonsfaktorer er uttrykt i gluten-spesifikke T-celler. Med doktorgradsstipendiat Michael Bodd har vi undersøkt cytokinproduksjon, spesielt IFN-gamma og IL-17 i gluten-spesifikke T-celler i T-celle linjer og kloner som er generert fra tynntarmslimhinne fra cøliakere, samt i blodet av cøliakere etter gluten-provokasjon. Artikkelen som beskriver funnene er nå publisert. I samarbeid med en nederlandsk gruppe ledet av Janneke Samsom har vi undersøkt markører som kan identifisere celler i blod som var imprintet i tarmslimhinne. En artikkel om disse funnene er akseptert for publikasjon. Sammen med 1. amanuensis Shuo-Wang Qiao undersøker vi T-celle-reseptorbruk i gluten-spesifikke celler sammenlignet med andre CD4+ T-celler i pasientene. Manuskript om funnene skrives sammen. Vi konkluderte med at andre markører, slik som CD154, er ikke egnet til å erstatte tetramerer for deteksjon av gluten-spesifikke T-celler.Vi er godt i gang med å undersøke frekvensen av gluten-spesifikke T-celler som gjenkjenner forskjellige epitoper, samt undersøkelsen om hvilke transkripsjonsfaktorer utrykkes av disse T-cellene mtp lineage differensiering. Vi undersøker også gluten-spesifikke T-celler fra tarmbiopsier av ubehandlede cøliakere og sammenligner disse med cellene i blod.
2009
Dette prosjektet fokuserer hovedsakelig på karakterisering av gluten-spesifikke T-celler som dukker opp i blodet av cøliakere etter glutenprovokasjon. Vår gruppe har utviklet en fargemetode, hvor gluten-spesifikke T-celler detekteres direkte i perifert blod med tetramerteknologi.Cøliaki er en kronisk betennelse i tynntarmslimhinnen utløst av gluten i hvete og liknende proteiner i bygg og rug. Gluten-spesifikke T-celler som dukker opp i blodet av cøliakere etter noen dagers gluten-provokasjon separeres og karakteriseres hovedsakelig med flow cytometri, med henblikk på cytokinproduksjon og uttrykk av T-cellereseptorvarianter. Andre markører, herunder CD154, blir også undersøkt med tanke på å erstatte tetramerer ved detektering av sirkulerende gluten-spesifikke T-celler. Det blir også brukt PCR for å undersøke hvilke transkripsjonsfaktorer er uttrykt i gluten-spesifikke T-celler. Prosjektet er godt i gang. Vi har søkt godkjenning fra REK Sør-Øst om å rekruttere 20 pasienter til i prosjektet. Det er utviklet en fargingsprotokoll for å undersøke hvilke og hvor mange egenskaper av gluten-spesifikke T-celler som kan undersøkes i en prøve, slik at relasjonen mellom cytokinproduksjon og forskjellige overflatemarkører kan belyses. Med doktorgradsstipendiat Michael Bodd har vi undersøkt cytokinproduksjon, spesielt IFN-gamma og IL-17 i gluten-spesifikke T-celler i T-celle linjer og kloner som er generert fra tynntarmslimhinne fra cøliakere, samt i blodet av cøliakere etter gluten-provokasjon. En artikkel som beskriver funnene ble submittert. I samarbeid med en nederlandsk gruppe ledet av Janneke Samsom har vi undersøkt markører som kan identifisere celler i blod som var imprintet i tarmslimhinne. En artikkel om disse funnene ble submittert. Sammen med 1. amanuensis Shuo-Wang Qiao undersøker vi T-celle-reseptorbruk i gluten-spesifikke celler sammenlignet med andre CD4+ T-celler i pasientene.
2008
Cøliaki er en kronisk betennelse i tynntarmslimhinnen utløst av hvetegluten. Vår gruppe har utviklet en fargemetode, hvor gluten-spesifikke T celler detekteres direkte i perifert blod. Målet med dette prosjektet er å karakterisere gluten-spesifikke T celler med henblikk på cytokinproduksjon, samt uttrykk av T cellereseptorvarianter.Cøliaki er en kronisk betennelse i tynntarmslimhinnen utløst av gluten i hvete og liknende proteiner i bygg og rug. Gluten-spesifikke T celler dukker opp i blodet til cøliakere etter kortvarig provokasjon med å spise gluten. Vår forskningsgruppe har utviklet en fargemetode, hvor gluten-spesifikke T-celler kan bli detektert direkte i perifert blod med tetramerteknologi. I dette prosjektet karakteriseres gluten-spesifikke T-celler med flow cytometri, med henblikk på cytokinproduksjon (spesielt IL-17 og IFN-gamma)og uttrykk av T-cellereseptorvarianter. Andre markører, herunder CD154, blir også undersøkt med tanke på å erstatte tetramerer ved detektering av sirkulerende gluten-spesifikke T celler. Prosjektet er godt i gang. Vi har planer om å inkludere 20-30 pasienter. Vi har undersøkt fire pasienter i prosjektet som vi hadde godkjenning for og har søkt godkjenning fra REK Sørøst om å rekruttere ytterligere 20 pasienter. Det er utviklet en fargingsprotokoll for å undersøke hvilke og hvor mange egenskaper av gluten-spesifikke T-celler som kan undersøkes i en prøve, slik at relasjonen mellom cytokinproduksjon og forskjellige overflatemarkører kan belyses. Det var gjort noen pilotforsøk for å undersøke T-cellereseptorbruk i gluten-spesifikke celler sammenlignet med alle CD4+ T-cellene i pasientene. Disse forsøkene tyder på at det er skjevhet i T-cellereseptorbruken, dvs. at noen typer T cellereseptorer forekommer oftere i gluten-spesifikke T-celler enn blant andre CD4+ T-celler i samme pasient.
Vitenskapelige artikler
Qiao Shuo-Wang, Iversen Rasmus, Ráki Melinda, Sollid Ludvig M

The adaptive immune response in celiac disease.

Semin Immunopathol 2012 Jul;34(4):523-40. Epub 2012 apr 26

PMID: 22535446

Bodd Michael, Kim Chu-Young, Lundin Knut E A, Sollid Ludvig M

T-cell response to gluten in patients with HLA-DQ2.2 reveals requirement of peptide-MHC stability in celiac disease.

Gastroenterology 2012 Mar;142(3):552-61. Epub 2011 nov 19

PMID: 22108197 - Inngår i doktorgradsavhandlingen

Bodd Michael, Tollefsen Stig, Bergseng Elin, Lundin Knut E A, Sollid Ludvig M

Evidence that HLA-DQ9 confers risk to celiac disease by presence of DQ9-restricted gluten-specific T cells.

Hum Immunol 2012 Apr;73(4):376-81. Epub 2012 jan 31

PMID: 22342873 - Inngår i doktorgradsavhandlingen

Qiao Shuo-Wang, Ráki Melinda, Gunnarsen Kristin S, Løset Geir-Åge, Lundin Knut E A, Sandlie Inger, Sollid Ludvig M

Posttranslational modification of gluten shapes TCR usage in celiac disease.

J Immunol 2011 Sep;187(6):3064-71. Epub 2011 aug 17

PMID: 21849672

du Pré M Fleur, van Berkel Lisette A, Ráki Melinda, van Leeuwen Marieke A, de Ruiter Lilian F, Broere Femke, Ter Borg Mariëtte N D, Lund Frances E, Escher Johanna C, Lundin Knut E A, Sollid Ludvig M, Kraal Georg, Nieuwenhuis Edward E S, Samsom Janneke N

CD62L(neg)CD38? expression on circulating CD4? T cells identifies mucosally differentiated cells in protein fed mice and in human celiac disease patients and controls.

Am J Gastroenterol 2011 Jun;106(6):1147-59. Epub 2011 mar 8

PMID: 21386831

Brottveit Margit, Ráki Melinda, Bergseng Elin, Fallang Lars-Egil, Simonsen Bjørg, Løvik Astrid, Larsen Stig, Løberg Else Marit, Jahnsen Frode L, Sollid Ludvig M, Lundin Knut E A

Assessing possible celiac disease by an HLA-DQ2-gliadin Tetramer Test.

Am J Gastroenterol 2011 Jul;106(7):1318-24. Epub 2011 mar 1

PMID: 21364548

Beitnes A-C R, Ráki M, Lundin K E A, Jahnsen J, Sollid L M, Jahnsen F L

Density of CD163+ CD11c+ dendritic cells increases and CD103+ dendritic cells decreases in the coeliac lesion.

Scand J Immunol 2011 Aug;74(2):186-94.

PMID: 21392045

Sollid L M, Khosla C

Novel therapies for coeliac disease.

J Intern Med 2011 Jun;269(6):604-13.

PMID: 21401739

Bodd M, Ráki M, Tollefsen S, Fallang L E, Bergseng E, Lundin K E A, Sollid L M

HLA-DQ2-restricted gluten-reactive T cells produce IL-21 but not IL-17 or IL-22.

Mucosal Immunol 2010 Nov;3(6):594-601. Epub 2010 jun 23

PMID: 20571486 - Inngår i doktorgradsavhandlingen

Doktorgrader
Michael Bodd

Gluten-reactive CD4+ T cells in celiac disease

Disputert:
mai 2012
Hovedveileder:
Ludvig M. Sollid

eRapport er utarbeidet av Sølvi Lerfald og Reidar Thorstensen, Regionalt kompetansesenter for klinisk forskning, Helse Vest RHF, og videreutvikles av de fire RHF-ene i fellesskap, med støtte fra Helse Vest IKT

Alle henvendelser rettes til eRapport

Personvern  -  Informasjonskapsler