Molekylarbiologiske markører ved testikkelkreft

Prosjektnummer: 911980
Ansvarlig person: Olav Dahl
Institusjon: Helse Bergen HF
Prosjektkategori: Åpen prosjektstøtte
Helsekategori: Cancer
Forskningsaktivitet: 4. Detection and Diagnosis

2017

Molekylarbiologiske analyser av mikroRNA som markører ved testikkelkreftTestikkelkreft pasienter kureres i dag med kirurgi og kjemoterapi. Behandlingen kan gi alvorlige bivirkninger og det er ofte vanskelig å vite hvor mange kurer som er nødvendig for at pasienten skal bli varig frisk. I prosjektet måles spesifikke mikrRNA (MiR 371-3 og 367) i blod som markør for sykdomsaktivitet og dermed behov for mer kjemoterapi.Vi har analysert blodprøver fra pasienter som har fått fjernet ene testikkelen på grunn av testikkelkreft. Analysene viser at mikroRNA 371-372-373 og 367 er forhøyet før fjerning av testikkelen, både ved non-seminom og seminom og mengden i blod faller markert i løpet av få dager. MikroRNA 367 er hos de fleste negativ slik at den neppe blir kandidat for videre studier. Ved seminom er der i dag ingen tumor markører og ved non-seminom er det mange pasienter (ca. 40 %) hvor vi ikke hadde markører som kunne si noe om sykdomsaktiviteten. Vi kan bekrefte funnet hos de fleste pasientene, men noen er negative. Dette gjelder som forventet teratomer, men også andre tumortyper. Vi trenger derfor noen flere pasienter for å få sikre data om målingene bekrefter at prøvene kan supplere de etablerte markørene AFP og hCGβ ved non-seminom og hvor gode analysene er for seminom. Vi har også funnet at de nevnte mikroRNAene er forhøyde ved metastatisk sykdom og de faller raskt når det gis effektiv cisplatin basert kjemoterapi (BEP regimet). Vi vil nå sammenligne fallet av at mikroRNA med de radiologiske data . Vi trenger derfor også her flere pasienter før vi kan trekke endelige konklusjoner. Vi håper de nye data kan gi en bedre veiledning om hvor mange kurer som skal til for å kontrollere sykdommen. Rekrutteringen i Oslo, Tromsø og Trondheim går seinere enn planlagt, men vi planlegger en publikasjon om påvisning av disse markørene før og etter orkiektomi i løpet av 2018. Vi har hatt et par pasienter med teratom i testikklen. Disse har ikke økte verdier av de selekterte mikroRNAene som er valgt ut fordi de har relasjon til embryonalt vev. Teratom er høyt differensierte svulster og vi planlegger å undersøke alle humane kjente mikroRNA i testisvev fra pasienter med teratom for å finne aktuelle nye mikroRNA. Vi har derfor samlet materiale fra hudceller som danner såkalte "embryoid bodies" som forstadium til teratomutvikling. Dette kan gi innsikt i nye aktuelle mikroRNA i teratomer. I delprosjektet planlegger vi også å samle inn primærtumor og metastaser som er fjernet med operasjon med diagnosen teratom fra parafininnstøpte vevsblokker. Vi isolerer microRNA fra de lagrede parafinblokkene og analyserer microRNA med sekvenseringsteknikk hvor vi kan påvise flere hundre forskjellige microRNA for å identifisere aktuelle kandidater som kan være karakteristiske for denne svulstformen. Målet er å identifisere aktuelle nye mikroRNA som kan brukes til diagnostikk ved testikulære teratom.

Beskriv brukermedvirkningen i prosjektet

Pasienter avgir blodprøver i forbindelse med behandling eller kontroll.

2016

MikroRNA som markører for sykdomsaktivitet ved testikkelkreft97-99 % av testikkelkreft pasienter kureres i dag med kirurgi og kjemoterapi. Behandlingen kan gi alvorlige bivirkninger og det er ofte vanskelig å vite om pasienten trenger mer kjemoterapi for å bli varig frisk. I prosjektet måles spesifikke mikrRNA (MiR 371-3 og 367) i blod som markør for sykdomsaktivitet og dermed behov for mer kjemoterapi.Prosjektet går etter planen ved Haukeland univ. sykehus. Vi har analysert blodprøver fra pasienter som har fått fjernet ene testikkelen på grunn av testikkelkreft. Analysene viser at mikroRNA 371-372-373 og 367 er forhøyet før fjerning av testikkelen, både ved non-seminom og seminom og mengden i blod faller markert i løpet av få dager. Ved seminom hadde vi før ingen tumor markør og ved non-seminom var det mange pasienter (ca. 40 %) hvor vi ikke hadde markører som kunne si noe om sykdomsaktiviteten . Vi trenger flere pasienter for å få sikre data om målingene er sikre nok til at vi kan redusere bruk av adjuvant kjemoterapi behandling til pasienter med seminom og nonseminom som i dag får slik behandling basert på histopatologiske risikoestimat. Vi har også funnet at de nevnte mikroRNAene er forhøyde ved metastatisk sykdom og faller raskt når det gis effektiv cisplatin basert kjemoterapi (BEP regimet). Når det gjelder nytten av mikroRNA for å monitorere effekten av kjemoterapi ser vi at mikroRNA faller meget raskt hos pasienter med god nytte av kjemoterapien vurdert med røntgenundersøkelser, men vi trenger flere pasienter før vi kan trekke endelige konklusjoner. Bare oppfølging vil gi oss data om disse analysene kan gi en bedre veiledning om hvor mange kurer som skal til for å kontrollere sykdommen. Prosjektet ble godkjent av REK desember 2015 men dessverre har søknadene fra Oslo enda ikke blitt behandlet av de lokale Personvernombudene slik at studien kan stare opp der. I Tromsø og Trondheim er man denne måneden klar for oppstart. Vi regner med å inkludere nok pasienter til første publikasjon om påvisning av disse markørene før og etter orkiektomi, i løpet av 2017. . Vi arbeider også med å sikkert fastslå hvilket nivå friske menn har av de aktuelle mikroRNA for å etablere en normalverdi for menn uten testikkelkreft. Underveis har vi hatt et par pasienter med testikulære teratom. Disse har ikke økte verdier av de selekterte mikroRNAene som er valgt ut fordi de har relasjon til embryonalt vev. Teratom er høyt differensierte svulster og vi arbeider derfor med skreening for humane kjente mikroRNA i testisvev fra pasienter med teratom for å finne aktuelle nye mikroRNA som kan brukes til å monitorere sykdomsaktivitet ved denne svulstformen. I et delprosjekt planlegger vi å samle inn primærtumor og metastaser som er fjernet med operasjon med diagnosen teratom fra parafininnstøpte vevsblokker. Vi isolerer microRNA fra de lagrede parafinblokkene og analyserer microRNA med sekvenseringsteknikk og ferdige chips hvor vi kan måle ca. 800 forskjellige microRNA for å påvise aktuelle kandidater som kan være karakteristiske for denne svulstformen. Eksperimentelt vil vi parallelt arbeide med "embryoid bodies" utviklet fra stamceller fra hud som kan dyrkes slik at de utvikler seg til teratom. Vi vil følge denne prosessen med analyse av mikroRNA for også på den måten å kunne identifisere aktuelle nye mikroRNA som kan brukes til diagnostikk ved testikulære teratom.

2015

Molekylarbiologiske markører ved testikkelkreft MikroRNA som markør for sykdomsaktivitetBasert på små pilotstudier er det publisert data om at noen mikroRNA som er uttrykt i testikkelkreftvev, også kan måles i blod. Mengden av mikroRNA i blodet vil derfor reflektere mengden av tilstedeværende aktive celler fra testikkelkreft. Prosjektet undersøker om de utvalgte mikroRNA kan benyttes for å påvise og følge sykdomsaktiviteten.Prosjektet fikk i 2015 godkjenning fra REK og det er startet analyser av pilotpasienter med henblikk på delprosjekt 1. Vi analyserer her først et bredt spekter av mikroRNA før og etter orkiectomi hos pasienter som er i stadium I. Første delmål er å bekrefte at de rapporterte mikroRNA (mir 367 og 371-372-373) er de beste kandidater eller om vi skal analysere flere i tillegg. Til dette brukes spesielle chips med mange mikroRNA. Senere vil vi konsentrere oss om disse i det videre prosjektet og påvise disse kvantitativt (med RT-qPCR metoden). Vi har blitt enige om å samarbeide om dette innen rammen av Swenoteka i Norge for å få prosjektet gjennomført så snart som mulig. Et problem er at orkiektomi gjøres ved mange sykehus og ikke alle har mulighet for å preparere og fryse ned blodprøver som vi trenger. I delprosjekt 2 skal de samme mikroRNA måles parallelt med de etablerte markørene AFP og hCGß hos pasienter med metastaser som får kjemoterapi. Her har vi etablert samarbeid med de tre andre universitetssykehusene som behandler testikkelkreft. Delprosjekt 3 går ut på å samle blodprøver ved avtalte rutinekontroller for å studere om stigning i de aktuelle mikroRNAene kan oppdage residiv før vi får utslag på analyser av AFP og hCGß (som i dag er standard) eller tilbakefall blir synlige på røntgenbilder. Dette delprosjektet vil strekke seg over noe lengre tid , men de fleste residiv kommer i løpet av 3 år. I løpet av inneværende år vil delprosjekt 4 bli utført ved å innkalle vevsblokker for de pasienter som inngår i studien og vi planlegger å analysere uttrykk av mikroRNA i primærtumor. Prosjektet rekrutterer nå pasienter og gjennomføres som planlagt. Det er enda for tidlig å kunne presentere noen resultater men arbeidet for utforming av protokoller og innkjøring av blodprøvehåndtering for prosjekt 1,2 og 3 er gjennomført. Også analysemetoden er kvalitetssikret..

Vitenskapelige artikler

Jacob H, Stanisavljevic L, Storli KE, Hestetun KE, Dahl O, Myklebust Mp

Identification of a sixteen-microRNA signature as prognostic biomarker for stage II and III colon cancer.

Oncotarget 2017 Oct 20;8(50):87837-87847. Epub 2017 sep 23

PMID: 29152124

Dale JE, Molinelli S, Ciurlia E, Ciocca M, Bonora M, Vitolo V, Mirandola A, Russo S, Orecchia R, Dahl O, Fossati P

Risk of carotid blowout after reirradiation with particle therapy.

Adv Radiat Oncol 2017 Jul-Sep;2(3):465-474. Epub 2017 jul 6

PMID: 29114615

Fjæra LF, Li Z, Ytre-Hauge KS, Muren LP, Indelicato DJ, Lassen-Ramshad Y, Engeseth GM, Brydøy M, Mairani A, Flampouri S, Dahl O, Stokkevåg CH

Linear energy transfer distributions in the brainstem depending on tumour location in intensity-modulated proton therapy of paediatric cancer.

Acta Oncol 2017 Jun;56(6):763-768. Epub 2017 apr 19

PMID: 28423966

Dale JE, Sebjørnsen S, Leh S, Rösler C, Aaserud S, Møller B, Fluge Ø, Erichsen C, Nadipour S, Kørner H, Pfeffer F, Dahl O

Multimodal therapy is feasible in elderly anal cancer patients.

Acta Oncol 2017 Jan;56(1):81-87. Epub 2016 nov 3

PMID: 27808666

Lunde S, Kristoffersen EK, Sapkota D, Risa K, Dahl O, Bruland O, Mella O, Fluge Ø

Serum BAFF and APRIL Levels, T-Lymphocyte Subsets, and Immunoglobulins after B-Cell Depletion Using the Monoclonal Anti-CD20 Antibody Rituximab in Myalgic Encephalopathy/Chronic Fatigue Syndrome.

PLoS One 2016;11(8):e0161226. Epub 2016 aug 18

PMID: 27536947

Fluge Ø, Mella O, Bruland O, Risa K, Dyrstad SE, Alme K, Rekeland IG, Sapkota D, Røsland GV, Fosså A, Ktoridou-Valen I, Lunde S, Sørland K, Lien K, Herder I, Thürmer H, Gotaas ME, Baranowska KA, Bohnen LM, Schäfer C, McCann A, Sommerfelt K, Helgeland L, Ueland PM, Dahl O, Tronstad KJ

Metabolic profiling indicates impaired pyruvate dehydrogenase function in myalgic encephalopathy/chronic fatigue syndrome.

JCI Insight 2016 Dec 22;1(21):e89376. Epub 2016 des 22

PMID: 28018972

Stanisavljevic L, Assmus J, Storli KE, Leh SM, Dahl O, Myklebust Mp

CXCR4, CXCL12 and the relative CXCL12-CXCR4 expression as prognostic factors in colon cancer.

Tumour Biol 2016 Jun;37(6):7441-52. Epub 2015 des 17

PMID: 26678887

Stanisavljevic L, Myklebust Mp, Leh S, Dahl O

LGR5 and CD133 as prognostic and predictive markers for fluoropyrimidine-based adjuvant chemotherapy in colorectal cancer.

Acta Oncol 2016 Dec;55(12):1425-1433. Epub 2016 jul 20

PMID: 27435662

Tandstad T, Ståhl O, Dahl O, Haugnes HS, Håkansson U, Karlsdottir Å, Kjellman A, Langberg CW, Laurell A, Oldenburg J, Solberg A, Söderström K, Stierner U, Cavallin-Ståhl E, Wahlqvist R, Wall N, Cohn-Cedermark G,

Treatment of stage I seminoma, with one course of adjuvant carboplatin or surveillance, risk-adapted recommendations implementing patient autonomy: a report from the Swedish and Norwegian Testicular Cancer Group (SWENOTECA).

Ann Oncol 2016 Jul;27(7):1299-304. Epub 2016 apr 6

PMID: 27052649

Oldenburg J, Haugnes HS, Dahl O, Karlsdottir Å, Langberg CW, Klepp O, Solberg A, Tandstad T

[Treatment for stage I-testicular cancer should be assessed individually].

Tidsskr Nor Laegeforen 2015 Aug 25;135(15):1340-1. Epub 2015 aug 25

PMID: 26315230

Tandstad T, Solberg A, Håkansson U, Stahl O, Haugnes HS, Oldenburg J, Dahl O, Kjellman A, Angelsen A, Cohn-Cedermark G,

Bilateral testicular germ cell tumors in patients treated for clinical stage I non-seminoma within two risk-adapted SWENOTECA protocols.

Acta Oncol 2015 Apr;54(4):493-9. Epub 2014 sep 5

PMID: 25192551

Fluge Ø, Risa K, Lunde S, Alme K, Rekeland IG, Sapkota D, Kristoffersen EK, Sørland K, Bruland O, Dahl O, Mella O

B-Lymphocyte Depletion in Myalgic Encephalopathy/ Chronic Fatigue Syndrome. An Open-Label Phase II Study with Rituximab Maintenance Treatment.

PLoS One 2015;10(7):e0129898. Epub 2015 jul 1

PMID: 26132314

Dahl O, Pfeffer F

Twenty-five years with adjuvant chemotherapy for colon cancer--a continuous evolving concept.

Acta Oncol 2015 Jan;54(1):1-4. Epub 2014 sep 29

PMID: 25263079

Sakkestad ST, Olsen BC, Karliczek A, Dahl O, Pfeffer F

Validity of Norwegian Rectal Cancer Registry data at a major university hospital 1997-2005.

Acta Oncol 2015 Nov;54(10):1723-8. Epub 2015 apr 23

PMID: 25904461

Guren MG, Kørner H, Pfeffer F, Myklebust TÅ, Eriksen MT, Edna TH, Larsen SG, Knudsen KO, Nesbakken A, Wasmuth HH, Vonen B, Hofsli E, Færden AE, Brændengen M, Dahl O, Steigen SE, Johansen MJ, Lindsetmo RO, Drolsum A, Tollåli G, Dørum LM, Møller B, Wibe A

Nationwide improvement of rectal cancer treatment outcomes in Norway, 1993-2010.

Acta Oncol 2015 Nov;54(10):1714-22. Epub 2015 apr 30

PMID: 25924970

Hestetun KE, Brydøy M, Myklebust Mp, Dahl O

Nuclear maspin expression as a predictive marker for fluorouracil treatment response in colon cancer.

Acta Oncol 2015 Apr;54(4):470-9. Epub 2014 sep 17

PMID: 25227897

Dahl O, Lehne G, Christoffersen T (Eds)

Medikamentell kreftbehandling. Cytostatikaboken. 1-661

Univ. i Oslo, Med Fak, Inst for Klinisk Medisin, Avd for farmakologi, 8. utg. 2016

Christoffersen T, Bruserud Ø, Fluge Ø, Lehne G, Dahl O.

Kreftbiologi og medikamentell terapi. Kap 1, 13-46.

Medikamentell Kreftbehandling. Cytostatikaboken 2016.

Dahl O, Kvaløy S, Lehne G, Christoffersen T.

Medikamentell kreftbehandling. Kap. 2 , 47-56.